제품

면역조직화학용 PHH3 항체 시약

IHC 항체 -- PHH3

양성 대조군:
Tonsil
셀룰러 현지화:
Nucleus
애플리케이션:
IHC-P
이차항체:
iVision™
카탈로그 번호:
AP0417
숙주 종:
Rabbit
클론:
polyclonal
사양/ml:
1、3、6、0.2（Concentrated）

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제품 상세 정보

【제품명 】

IHC 항체 -- PHH3

【 포장 사양 】

암호

클론

명세서

AP0417

다클론성

0.1ml , 0.2ml , 1ml, 1.5ml , 3ml , 6ml , 11ml , 30ml

【용도 】

연구용으로만 사용하십시오. PHH3 항체 시약은 면역조직화학적 검출 시스템을 사용하여 FFPE 조직 절편에서 현미경으로 PHH3를 정성적으로 식별하는 데 사용하기 위한 것입니다 .

【원칙 】_

Phosphohistone H3(PHH3)은 다른 히스톤과 함께 진핵 세포에서 염색질의 주요 단백질 구성 요소를 형성하는 핵심 히스톤 단백질입니다. 면역조직 화학적 연구 는 항-PHH3가 세린 10 또는 세린 28에서 인산화될 때만 코어 단백질 히스톤 H3 을 특이 적 으로 검출 함 을 보여 주었습니다 . 항체 - 일차 항체 - 항원 복합체 . DAB 발색 용액을 첨가하면 HRP가 효소 기질과 반응하여 갈색의 불용성 반응 생성물을 생성하는데, 이는 간접적으로 항원의 존재를 나타냅니다.

【주요성분 】

I 면역글로불린, 항체 희석제

【보관 】

2～8℃ 에서 18 개월간 보관 。

【샘플 요구 사항 】

FFPE 조직은 일반적 으로 마이크로톰을 사용하여 3 ~ 5μm 정도로 얇게 절단합니다 . 이 섹션은 조직 접착제로 코팅된 유리 슬라이드에 장착됩니다.

【프로토콜 】

1. 시료준비 : 슬라이드를 크실렌 Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ 에서 5 분 동안 탈 파라핀 처리한다 . 슬라이드를 각각 2분 동안 100%, 100%, 95 % , 75% 알코올 로 한 번 옮긴다 . 30초 동안 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

2 . 차단 : 내인성 과산화효소 활성을 차단하기 위해 3% H ₂ O ₂ 용액 에서 실온에서 5 분간 배양하여 내인성 과산화효소 활성을 차단합니다 . 30초 동안 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

3 . Antigen retrieval : EDTA Antigen retrieval buffer를 100 ℃ 로 가열한다 . 그런 다음 슬라이드를 끓인 버퍼에 넣고 15 ~ 20분 동안 계속 가열합니다. 30분간 자연 냉각합니다. 세척 버퍼로 샘플을 헹굽니다.

4 . 1차 항체 배양: 슬라이드를 비웁니다. 1차 항체를 조직에 첨가하고 실온 에서 30 분 동안 배양 합니다 . (대조군으로 항체 희석제 또는 PBS 사용) . PBST에서 슬라이드를 2회, 매번 5분 동안 세척합니다. 1차 항체가 농축되어 있는 경우 포장 안내에 따라 RTU(ready to use)로 희석하여 사용하십시오 .

5. 2차 항체 : 슬라이드를 비웁니다. 조직에 2 차 항체를 추가하고 실온에서 20 분 동안 배양 합니다 . PBST에서 슬라이드를 2회, 각 회당 5분 동안 세척합니다 .

6. DAB ：슬라이드를 비웁니다. 조직에 DAB를 추가 하고 실온에서 5분 동안 배양합니다. 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

7. 헤마톡실린 염색 ：슬라이드를 비운다. 조직에 헤마톡실린을 첨가하고 실온에서 5분 동안 배양 합니다 . 물로 슬라이드를 헹굽니다. 차별화를 위해 산 용액을 사용합니다 . 물로 슬라이드를 헹굽니다.

8. 탈수 : 슬라이드를 75% , 95% , 100% 알코올에 2 분간 탈수 시킨다 . 슬라이드를 말립니다. 마운팅 매체를 사용하여 커버슬립으로 염색된 조직을 덮습니다.