제품

면역조직화학용 EGFR 항체 시약

EGFR 항체 시약 —— Primary Antibo d y

양성 대조군:
Skin
셀룰러 현지화:
Cytoplasm/cell membrane
애플리케이션:
IHC-P
이차항체:
iVision™
사양/ml:
1、3、6、0.2（Concentrated）

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제품 상세 정보

【제품명 】

EGFR 항체 시약 —— Primary Antibo d y

【용도 】

연구용으로만 사용하십시오. EGFR Antibody 시약은 면역조직화학 검출 시스템을 사용하여 FFPE 조직 절편에서 현미경으로 EGFR을 정성적으로 식별하는 데 사용하기 위한 것입니다 .

【원칙 】_

EGFR은 표피 성장 인자에 결합할 수 있는 세포외 기능 도메인, 짧은 막관통 도메인 및 티로신 키나제 활성을 갖는 세포내 도메인으로 구성된 유형 I 성장 인자 수용체 패밀리 의 구성원이다 . EGFR은 많은 정상 조직, 특히 중층 상피 및 편평 상피의 기저층에서 발현됩니다. EGFR 과발현은 유방, 방광, 폐, 위, 식도 및 두경부 종양과 같은 많은 종류의 종양 조직에서 발견됩니다. 1 차 항체를 추가 하여 조직 절편에 항원 을 결합 시킨 다음 HRP 표지된 2차 항체 결합 1 차 항체를 사용하여 이차항체 - 일차항체 - 항원복합체 . DAB 발색 용액을 첨가하면 HRP가 효소 기질과 반응하여 갈색의 불용성 반응 생성물을 생성하는데, 이는 간접적으로 항원의 존재를 나타냅니다.

【주요성분 】

I 면역글로불린, 항체 희석제

【보관 】

2～8℃ 에서 18 개월간 보관 。

【샘플 요구 사항 】

FFPE 조직은 일반적 으로 마이크로톰을 사용하여 3 ~ 5μm 정도로 얇게 절단합니다 . 이 섹션은 조직 접착제로 코팅된 유리 슬라이드에 장착됩니다.

【프로토콜 】

1. 시료 준비 : 슬라이드를 자일렌 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ에서 5분 동안 탈파라핀화하고 슬라이드 를 각각 2 분 동안 100 % , 100 %, 95 % , 75% 알코올 로 한 번 옮깁니다 . 30초 동안 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

2 . 차단 : 내인성 과산화효소 활성을 차단하기 위해 3% H ₂ O ₂ 용액 에서 실온에서 5 분간 배양하여 내인성 과산화효소 활성을 차단합니다 . 30초 동안 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

3 . Antigen retrieval : EDTA Antigen retrieval buffer를 100 ℃ 로 가열한다 . 그런 다음 슬라이드를 끓인 버퍼에 넣고 15 ~ 20분 동안 계속 가열합니다. 30분간 자연 냉각합니다. 세척 버퍼로 샘플을 헹굽니다.

4 . 1차 항체 배양: 슬라이드를 비웁니다. 1차 항체를 조직에 첨가하고 실온 에서 30 분 동안 배양 합니다 . (대조군으로 항체 희석제 또는 PBS 사용) . PBST에서 슬라이드를 2회, 매번 5분 동안 세척합니다. 1차 항체가 농축되어 있는 경우 포장 안내에 따라 RTU(ready to use)로 희석하여 사용하십시오 .

5. 2차 항체 : 슬라이드를 비웁니다. 조직에 2 차 항체를 추가하고 실온에서 20 분 동안 배양 합니다 . PBST에서 슬라이드를 2회, 각 회당 5분 동안 세척합니다 .

6. DAB ：슬라이드를 비웁니다. 조직에 DAB를 추가 하고 실온에서 5분 동안 배양합니다. 탈이온수로 슬라이드를 헹굽니다.

7. 헤마톡실린 염색 ：슬라이드를 비운다. 조직에 헤마톡실린을 첨가하고 실온에서 5분 동안 배양 합니다 . 물로 슬라이드를 헹굽니다. 차별화를 위해 산 용액을 사용합니다 . 물로 슬라이드를 헹굽니다.

8. 탈수 : 슬라이드를 75% , 95% , 100% 알코올에 2 분간 탈수 시킨다 . 슬라이드를 말립니다. 마운팅 매체를 사용하여 커버슬립으로 염색된 조직을 덮습니다.

【긍정적인 현지화 】

1. 양성 국소화 : 세포막 / 세포질.

2. 양성 대조군 : 태반 조직.

【주의사항 】

1. 사용하기 전에 지침을 주의 깊게 읽고 키트의 모든 구성 요소에 익숙해지십시오. 작동 중에는 지침을 엄격히 따르십시오.

2. 키트 또는 키트 구성품을 사용하지 마십시오.

3. 교육을 받은 전문가만 이 키트를 사용할 수 있습니다. 시약을 취급하는 동안 적절한 실험복과 일회용 장갑을 착용하십시오.

4. 화학물질이 피부, 눈, 점막에 닿지 않도록 하십시오.